Este kit ha sido optimizado para eficiente y rápida extracción de ADN bacteriano (Listeria, Salmonella, E.coli, etc.) listo para la PCR a partir de cultivos de pre-enriquecimiento o enriquecimiento de diferentes muestras de alimentos, materias primas o heces utilizando columnas MicroSpin que unen selectivamente el ADN.
La detección de niveles muy bajos de contaminación bacteriana en alimentos y muestras fecales requiere que estas muestras se cultiven previamente unas horas en un caldo de enriquecimiento adecuado. El uso del enriquecimiento de cultivos antes del análisis por PCR tiene muchos propósitos, entre ellos:
1) Dilución de las sustancias inhibitorias de la PCR presentes en la matriz de la muestra.
2) Multiplicación del organismo objetivo para proporcionar concentraciones detectables.
3) Dilución de células muertas.
4) Posibilidad de aislar el organismo objetivo para pruebas complementarias.
Especificaciones:
• Tecnología de MicroSpin columnas con membranas de fibra de vidrio.
• Completa eliminación de los inhibidores de la PCR.
• ADN listo para uso en PCR y Real Time PCR.
• Tamaño de la muestra: a partir de 1 ml de medio de enriquecimiento de diferentes muestras de alimentos o heces.
El procedimiento incluye una centrifugación de 1 ml de medio de enriquecimiento para concentrar las células, las células son lisadas durante un periodo de incubación con Solución de Lisis y Lisozima (suministrada con el kit). Después una digestión con Proteinasa K (suministrada con el kit) y limpieza de la mezcla de lisis por centrifugación y unión del ADN a las membranas de fibra de vidrio empaquetadas en MicroSpin columnas. El ADN que se une es purificado mediante varios lavados para eliminar los potenciales inhibidores de la PCR y finalmente el ADN es eluido.
